SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING TESTET
Malaria är en myggburen, hemolytisk febersjukdom som infekterar över 200 miljoner människor och dödar mer än 1 miljon människor per år.Det orsakas av fyra arter av Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale och P. malariae.Alla dessa plasmodier infekterar och förstör mänskliga erytrocyter, vilket ger frossa, feber, anemi och splenomegali.P. falciparum orsakar allvarligare sjukdomar än de andra plasmodiaterna och står för de flesta malariadödsfall.P. falciparum och P. vivax är de vanligaste patogenerna, men det finns en betydande geografisk variation i artfördelningen.
Traditionellt diagnostiseras malaria genom demonstration av organismer på Giemsa-färgade tjocka utstryk av perifert blod, och de olika arterna av plasmodium kännetecknas av deras utseende i infekterade erytrocyter1.Tekniken är kapabel till exakt och tillförlitlig diagnos, men endast när den utförs av skickliga mikroskopister som använder definierade protokoll2, vilket utgör stora hinder för avlägsna och fattiga områden i världen.
Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit är utvecklat för att lösa dessa hinder.The test utilizes a pair of monoclonal and polyclonal antibodies to P. falciparum specific protein, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II), and a pair of monoclonal antibodies to plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH), a protein produced by the four species of the plasmodium, thus enables simultaneous detection and differentiation of the infection with P. falciparum and or any of the other three plasmodia.Det kan utföras av outbildad eller minimalt kunnig personal, utan laboratorieutrustning.
PRINCIP
Pf/Pan Malaria Rapid Test kit är en lateral flödeskromatografisk immunanalys.Testremsans komponenter består av: 1) en vinröd färgad konjugatkudde innehållande mus anti-pHRP-II antikropp konjugerad med kolloid guld (pHRP II-guld konjugat) och mus anti-pLDH antikropp konjugerad med kolloid guld (pLDH-guld konjugat),
2) en nitrocellulosamembranremsa innehållande två testband (Pan- och Pv-band) och ett kontrollband (C-band).Pan-bandet är förbelagt med monoklonal anti-pLDH-antikropp genom vilken infektionen med någon av de fyra arterna av plasmodia kan detekteras, Pf-bandet är förbelagt med polyklonala anti-pHRP-II-antikroppar för detektion av Pf-infektion, och C-bandet är belagt med get-anti-mus IgG.
Under analysen dispenseras en tillräcklig volym av blodprovet i provbrunnen (S) på testkassetten, en lysbuffert tillsätts till buffertbrunnen (B).Bufferten innehåller ett rengöringsmedel som lyserar de röda blodkropparna och frigör olika plasmodiumantigener, som migrerar genom kapillärverkan över remsan som hålls i kassetten.pHRP-II om det finns i provet kommer att binda till pHRP II-guldkonjugaten.Immunkomplexet fångas sedan upp på membranet av de förbelagda anti-pHRPII-antikropparna, vilket bildar ett vinrött färgat Pf-band, vilket indikerar ett Pf-positivt testresultat.pLDH om det finns i provet kommer att binda till pLDH-guldkonjugaten.Immunkomplexet fångas sedan på membranet av den förbelagda anti-pLDH-antikroppen, vilket bildar ett vinröd färgat Pan-band, vilket indikerar ett plasmapositivt testresultat.I avsaknad av Pan-band kan ett positivt testresultat för någon av de andra tre plasmodierna rekommenderas.
Frånvaro av testband (Pan och Pf) tyder på ett negativt resultat.Testet innehåller en intern kontroll (C-band) som bör uppvisa ett vinröd färgat band av immunkomplexet av get-anti-mus-IgG/mus-IgG (pHRP-II och pLDH-guldkonjugat) oavsett färgutvecklingen på något av testbanden.Annars är testresultatet ogiltigt och provet måste testas igen med en annan enhet.
